一篇关于急性眼刺激试验的介绍，拿走不谢

急性眼刺激试验去哪里?北检院生物医药检测中心可提供急性眼刺激试验服务，北检院科研团队强大，秉承科研、奉献理念，拥有百余台仪器设备，实验仪器齐全。

试验周期：一般检测周期为7-15个工作日(毒理学实验、降解实验除外)

试验费用：免费初检小样，初检之后实验室工程师根据客户检测需求以及实验复杂程度进行报价。

眼刺激试验介绍：眼刺激性测试试验在农药、兽药、化妆品、洗化用品、新化学品等化学品的登记注册、新品研发、质量检测等领域属于常见的毒性检测资料之一。由于这些化学品对眼睛的刺激性伤害，不仅会造成眼部损伤，而且可能还会由于局部刺激致使结膜的血管和淋巴管扩张，最终引起全身毒副作用。所以想要充分、合理、安全使用化学品，眼刺激性试验就成为评估、测量化学品毒性的重要参考动物试验之一。

北检院急性眼刺激试验流程

1、邮寄样品(与工程师沟通，提交检测需求，并给我们研究所寄样)

2、初检小样(收到样品之后，免费初检，制定检测方案)

3、工程师报价(根据客户检测需求，以及实验复杂程度进行报价。)

4、签订委托书(双方确定，签订委托书，严格保护客户隐私)

5、开始检测(与客户交流实验方案，开始具体的实验。)

6、实验结束(完成实验，邮寄检测报告，提供后期服务。)

眼刺激试验标准

我国现行眼刺激试验标准大约共 14 项(如下表)，其中国家标准 4 项，行业标准 3 项，团体标准 6 项，地 方标准 1 项;化学品检测的标准 3 项，化妆品检测标准 9 项，农药检 测标准 1 项，保健产品检测标准 1 项。

上表中，国家标标准1、2、3、4和地方标准14均是传统的体内 Draize 兔眼刺激试验。行业标准5、6、7和团体标准8、9、10、11、12、13均为化妆品的体外替代测试方法，检测对象特定。根据检测原理这些标准可以分为细胞膜损伤检测(5、8 、9 、 11)、细胞毒性检测(6)和非实验动物组织替代兔眼检测(7、10、12、13)。这些检测方法不能完全模拟眼刺激发生时的机体环境，检测的毒性指标为毒效应的终点指标，无法反映毒作用早期的变化，灵敏度不足。并且这些方法不能反映眼刺激发生的分子机制，有较高的假阳性和假阴性率。因此，本文提出针对化学品可建立通用性、灵敏、准确的基于 TRPV1 通道活性检测的眼刺激性测试方法。

TRPV1 活性检测技术

TRPV1 是一种对钙离子有高渗透性的非选择性阳离子通道，主要分布于背根神经节和三叉神经节中的神经元。

通常情况下，眼刺激性化学品可以通过激活眼球的感受器，释放炎症介质，使眼球产生刺激性症状，因此可以通过测试这些感受器的活性状态反映受试物的眼刺激性。伴随着三叉神经眼支的感觉神经纤维，TRPV1 广泛分布在角膜、虹膜、结膜、泪腺等眼部结构。眼刺激性化学品可激活 TRPV1引起细胞外 Ca2+内流，导致细胞内 Ca2+浓度迅速升高。因此，通过测试化学品作用于TRPV1-HEK293细胞后的胞内Ca2+浓度改变，反映 TRPV1 活性的实时变化，从而定性地检测化学品的眼刺激性反应。

TRPV1 活性试验步骤介绍

TRPV1 活性试验采用稳定转染TRPV1的人胚胎肾293细胞为检测对象，固体受试物以最大溶解度下的溶液作为受试溶液，液体受试物以原液为受试溶液。TRPV1-HEK293细胞先与Ca2+染料孵育，在470 ~ 495 nm激发波长下，515 ~ 575nm范围内以1s的采样间隔采集基础荧光信号F0。测试开始后，先不加样品，连续检测细胞板的基线荧光强度60 s，以最初10个时间点荧光信号的平均值作为基础荧光强度值(F0)。随后，自动加样并连续检测荧光强度值(F)400 s，检测时间共460 s。分别计算每个测试时间点各孔荧光强度F的平均值F和相对荧光强度F/F0，生成时间-F/F曲线。计算时间-F/F0曲线60 s ~ 300 s的曲线下面积(Area Under Curve，AUC)，将AUC值作为钙离子内流效应的衡量指标。

计算方法

试验按照下列方程进行计算：

式中，AUCB指空白孔的AUC值，AUCHBSS 指缓冲液对照孔的AUC值，AUCSC 指溶剂对照孔的AUC值，AUCPC指阳性对照孔的AUC值，AUCC- 指受试样品无辣椒平孔的AUC值，AUCC+指受试样品辣椒平孔的AUC值。

判定原则

结果判断规则如下：

(1)首次测试时，如EB < 10%、ESC < 10%，同时EPC > 150%，试验结果有效。

(2)受试样品的EC- < 20%，样品无刺激性。

(3)受试样品的EC- ≥ 20%，且EC+ ≤ 75%，样品具有潜在眼刺激性。

(4)受试样品的EC- ≥ 20%，但EC+ > 75%，则需将样品进行稀释后进行二次测试。二次测试的结果中，受试样品任一浓度的EC+ ≤75% EC-，样品具有潜在眼刺激性。

(5)若测试结果不符合上述标准，可按照GB/T 21609-2008的方法检测。

为什么要选择北检院做试验?

1、北检院拥有百余台仪器设备，实验仪器齐全。

2、主要从事于成分分析、失效分析、未知物分析、力学性能检测、元素分析、疲劳试验、工业问题诊断分析等领域，为全国多地客户提供分析测试服务。

3、十多年行业经验积累，专注于科研分析测试、推动科研创新！

4、北检院检测中心拥有一支高素质的科研检测团队，一直奉行科学严谨的服务理念，始终以科学研究为主，以客户为中心，为客户提供优质、公正的分析检测服务。

5、为客户提供原始数据报告，出具的检测报告认可度高、适用范围广，全国范围内支持一键扫码查询真伪。

以上是关于急性眼刺激试验的相关介绍，如有其他需求可以咨询实验室工程师帮您解答。