转录组学样品如何保存与寄送：温度时限与操作要点详解

转录组学样品是开展转录组测序与表达谱分析的物质基础，涵盖组织块、细胞、全血及提取后的RNA等多种形态。此类样品中的RNA极易降解，保存温度、运输时限与包装方式直接决定数据质量。本文围绕保存与寄送全流程，依次说明样本类型与采集规范、微流控电泳法完整性测定、温度与时限控制、干冰冷链包装及质量验收标准，为送样前处理提供可操作的技术要点。

保存与寄送要点

转录组学样品自离体或处理后即进入RNA降解倒计时，保存与寄送的核心原则为低温、迅速、无菌与防污染。取样前后应佩戴手套并使用无RNA酶的耗材，器械经高温或专用处理以灭活RNA酶。样品分装宜小量化，避免反复冻融引起RNA断裂。寄送前须核对送样单信息，样品编号、类型、数量与保存方式，随箱附纸质单据。整体流程应做到取样后即刻稳定化处理、全程低温、冷链不间断，使RNA状态在抵达实验室时仍满足建库要求。

样本类型与采集规范

常见样品类型动物与植物组织、培养细胞、全血及已提取的总RNA。组织样品采集后应以预冷生理缓冲液快速漂洗，去除血污与杂质，吸干后切成小块分装。植物组织宜取幼嫩、代谢活跃部位，避免老化组织带来的多糖多酚干扰。培养细胞可经离心收集后弃尽上清，或直接加入裂解保存液处理。全血样品应采用相应的RNA稳定抗凝采血管采集，采血后颠倒混匀并室温静置片刻以待稳定剂充分作用。提取好的RNA应溶于无RNA酶水中，标注浓度与体积。

RNA完整性测定——微流控电泳法

RNA完整性是转录组建库成败的关键指标，实验室通常采用微流控芯片电泳法测定。该方法将样品与荧光染料混合后注入芯片微通道，在电场驱动下按片段大小分离，由激光诱导荧光检测各条带信号，系统自动生成RIN值（RNA完整性数值）。RIN以十年连续刻度表示，数值越高表明RNA降解越少。报告同时给出28S与18S条带的峰形与比值信息，用于辅助判断降解程度。送样方可在寄送前自行测定，也可委托具备权威资质认证的实验室统一测定，以确认样品在寄送前后状态一致。

保存温度与运输时限

不同样品类型的保存温度与可耐受时限存在差异，须分类处理。加入RNA稳定保存试剂的组织，通常可于短期常温或冷藏条件下暂存，并尽快寄送。未经稳定的组织样品应速冻后置于低温保存，常用方式为液氮速冻后转入超低温冰箱，运输时以干冰维持冻结状态。全血RNA稳定采血管采集的样品，可按试剂说明在室温下存放数日后寄送。已提取的RNA宜于低温或超低温保存，并避免反复冻融。运输时限以冷链不中断为前提，样品到站后应及时转入实验室低温环境暂存。

寄送包装与干冰冷链操作

寄送包装须兼顾保温、防震与防泄漏。冻存管应以parafilm封口膜缠绕管口，装入自封袋并填充吸水纸，再置于泡沫箱内固定。干冰应砸碎后均匀填充于样品周围，用量按运输时长与环境温度估算，宜预留余量以应对运输延误。泡沫箱外加纸箱防护，标注生物学样品与保持低温提示。选择具备冷链运输能力的服务，尽量安排在工作日寄出，避开节假日滞留。随附冰排的常规冷藏样品应与干冰样品分区放置，避免混淆。寄出后及时告知接收方运单信息，便于跟踪与接收。

样品质量验收判定标准

实验室收样后依统一标准进行验收。组织类样品核查冻存状态、有无融化痕迹与污染变色；RNA样品核查浓度、纯度与完整性，通常以核酸吸光度比值判断蛋白与有机物残留，以RIN值判断降解程度。一般而言，RIN达到较高水平方可用于常规转录组建库，略有降解的样品可评估后转用于降解容忍度更高的建库方案。验收记录外观、数量、温度记录与单据一致性。对不符合要求的样品，实验室应及时反馈送样方，说明原因并给出补样或替代方案，避免后续数据失真。

常见问题与注意事项

保存时应优先选择哪种稳定方式？

组织样品优先采用液氮速冻或RNA稳定保存试剂处理，全血选用RNA稳定采血管。两者均能抑制RNA酶活性，区别在于速冻须配合低温运输，稳定试剂可短期常温寄送。

判断能否建库的主要指标有哪些？

判定以RIN值为核心，结合核酸吸光度比值与28S/18S峰形综合评估。RIN较高者适用于常规建库；数值偏低时可评估改用对降解容忍度更高的建库方案。

哪些类型的样品可按本流程保存与寄送？

本流程适用于动物与植物组织、培养细胞、全血及提取后的总RNA等多种转录组学样品。不同类型在采集规范、稳定方式与冷链要求上存在差异，应分类执行相应操作。